作者：李铁纯， 张捷莉， 彭博， 兴东杰， 李学成
【关键词】 反相高效液相色谱法；,,炎可宁；,,黄芩苷
摘要：目的测定炎可宁中有效成分-黄芩苷的含量。方法反相高效液相色谱法：色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相为甲醇-水-磷酸（60∶40∶0.2）；检测波长：280 nm；流速：1.0 ml?min-1；柱温：30℃。结果建立了对炎可宁片中黄芩苷进行定量的测定方法，并将此方法用于3个不同厂家生产的炎可宁片中黄芩苷含量的测定。结论 为中药复方提供了更加简便、合理、可靠的质控方法。
关键词：反相高效液相色谱法； 炎可宁； 黄芩苷
Determination of Baicalin in Yankening by RP-HPLC
Abstract：ObjectiveTo determine the bioactive compound's content of baicalin in Yankening. MethodsRP-HPLC,Kromasil C18 column(4.6 mm×150 mm,5 μm) with methanol-water-phosphoric acid(60∶40∶0.2) as mobile phase. The flow rate was 1ml/min,the column temperature was 30℃and detection was effecive at 280 nm. ResultsThis method was applied to determine baicalin in Yankening produced by different factories successfully. Conclusion This is a more convenient, reasonable and credible quality control method for the Chinese traditional medicine.
Key words：RP-HPLC； Yankening； Baicalin
炎可宁为国家准字号中成药，由黄连、黄柏、板蓝根、大黄、黄芩等5味中药组成，主要用于清热泻火，消炎止痢。作为处方中的主药黄芩性苦寒，具有清热燥湿，泻火解毒，止血安胎的作用〔1〕，所含黄芩苷（结构式见图1）是一种黄酮类化合物，有抗炎、抗菌、解热等作用〔2〕。以黄芩苷为定量监控指标可有效地控制产品质量。有关黄芩苷的含量测定方法有比色法〔3〕、分光光度法〔4〕、薄层扫描法〔5〕、高效液相色谱法〔6〕等。在《中国药典》中对炎可宁中黄芩苷含量的测定还没有记载，本文研究了利用反相高效液相色谱法测定了3个不同厂家生产的炎可宁片中黄芩苷的含量。本法具有操作简单、准确、重现性好等优点，同时也为中药复方提供了更加简便、合理、可靠的质控方法。
1 仪器与试剂
美国Waters公司高效液相色谱仪（带有Waters 1525液相泵，Waters 2996二极管阵列检测器），超声波清洗器（KQ-250A，昆山市超声波仪器厂），上皿电子天平（FA2004，上海天平仪器厂），TG328B分析天平（上海天平仪器厂），低速离心机（北京医用离心机厂）。
图1 黄芩苷结构式（略）
对照品：黄芩苷（中国药品生物制品检定所，供含量测定用）。炎可宁片（市售），甲醇（天津市光复精细化工研究所，色谱纯），无水乙醇（沈阳新兴试剂厂，分析纯），甲醇（沈阳市合富化学试剂经销厂，分析纯）高锰酸钾（丹东市胜利化工厂），二次蒸馏水（自制）。
2 方法与结果
2.1 溶液的制备对照品溶液的制备：精密称量干燥至恒重的黄芩苷对照品25 mg置于50 ml容量瓶中，用50％甲醇进行溶解，并超声处理20 min，水浴（50℃）10 min，冷却至室温，再用50％甲醇定容至50 ml，摇匀，即得0.5 mg/ml的黄芩苷贮备液。准确吸取贮备液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0 ml，分别置于10 ml容量瓶中，用50％甲醇稀释至刻度，所得对照品的浓度分别为25，50，100，150，200 μg/ml。样品溶液的制备：精密称取除去糖衣的3个厂家的炎可宁样品，加入甲醇30 ml，超声处理20 min，放置至室温，再用离心机以3 500 r/min的速度离心15 min，取离心液5.0 ml，用甲醇稀释至10 ml，即得样品溶液。
2.2 色谱和检测条件色谱柱：Kromasil C18分析柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)；流动相：甲醇水磷酸（60∶40∶0.2）；检测波长：280 nm；流速：1.0 ml?min-1；柱温：30℃；进样体积：10 μl。