肝脂清颗粒剂对非酒精性脂肪肝大鼠空腹胰岛素含量及胰岛素抵抗的影响(一)

【摘要】 目的:通过观察非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗指数(IR)含量的变化,探讨肝脂清颗粒剂治疗脂肪肝的机理。方法:采用高脂饲料复制脂肪肝模型,并以放射免疫法检测IR水平。结果:与正常对照组相比,造模组血液及肝组织中的IR升高(P<0.01),经防治与治疗后,阳性表达率明显降低,其差异具显著性。结论:肝脂清颗粒剂有阻断氧化应激、减轻炎性反应的作用,对于非酒精性脂肪肝作用确切。

【关键词】 肝脂清颗粒剂 非酒精性脂肪肝 模型 动物 IR

  肝脂清颗粒剂由黄连、黄芩、陈皮、茯苓、冬瓜仁、海蛤粉等15味中药组成,具有健脾行气、化痰通络、软坚散结的功效,临床用于治疗和预防各种类型的脂肪肝。本研究通过观察其对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗指数的变化,探讨其治疗脂肪肝的机理。

  1 材料和方法

  1.1 材料 动物与饲料:健康雄性Wistar大鼠125只,体重(130±10)g,购于山东大学实验动物中心,鲁动质字D20021024,SPF级。大鼠普通饲料及高脂饲料(普通饲料+15%猪油、2%胆固醇、5%蛋黄粉、0.5%胆酸钠)均由山东中医药大学实验动物中心提供。

  药物与试剂:肝脂清颗粒剂:由山东中医药大学附属医院制剂室提供。东宝肝泰片:通化东宝药业股份有限公司生产,国药准字:H22024764,批号:040302。胰岛素放射免疫分析试剂盒,购自潍坊三维生物工程集团有限公司。

  主要仪器:TG328B电子分析天平:上海天平仪器厂。GMJ型全自动放射免疫γ计数器:江苏省电子医疗研究所;放射免疫仪:北京东恒仪器厂;匀浆器。

  1.2 方法

  1.2.1 动物模型的建立 采用高脂饲料喂养法建立大鼠脂肪肝模型。空白组喂以普通饲料,正常饮水。非酒精性脂肪肝组喂以高脂饲料,正常饮水。造模12周。

  1.2.2 动物分组及处理方法 Wistar大鼠80只常规饲养1周后分组处理,分组采用随机方法:将大鼠分别按体重标号(1~80只),查随机排列表,将动物编号与表中的随机数字相对应,分为8组:即正常空白组:采用普通饲料饲养,正常饮水,12周后处死;脂肪肝模型组:采用高脂饲料饲养,正常饮水,12周后处死;脂肪肝防治组:在给予高脂饲料的同时,给予肝脂清0.75g/100g体重灌胃,每日1次,连续12周后处死;正常保留组;处理方法同正常空白组,连续22周后处死;脂肪肝模型自然恢复组:前12周同模型组、后10周普通饲料饲养,正常饮水;肝脂清治疗高剂量组:前12周同模型组、后10周在正常饲养的同时给予肝脂清3.75g/100g体重灌胃,每日1次;肝脂清治疗低剂量组:前12周同模型组、后10周在正常饲养的同时给予肝脂清1.88g/100g体重灌胃,每日1次;东宝肝泰组:前12周同模型组、后10周在正常饲养的同时给予东宝肝泰0.1g/100g体重灌胃,每日1次。

  2 结果

  所有动物每隔2周后称重记录,观察并记录动物的饮食活动、毛色、死亡等情况。分别于12周末及22周末处死动物,全部称重后腹腔注射2%戊巴比妥钠(按4.5mg/kg)麻醉后腹腔静脉取血处死,称取全肝湿重并记录,取相同部位肝组织,用匀浆器匀浆,按照试剂盒要求采用化学比色法测定肝组织及血清中的胰岛素(INS)含量。